产品货号:
BM0375
中文名称:
Nt.BspQI切刻内切酶
英文名称:
Nt.BspQI
产品规格:
2000U
发货周期:
1~3天
产品价格:
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Nt.BspQI是一种切刻内切酶,仅切割dsDNA底物的一条链;在dsDNA底物上产生切口,而不切开dsDNA。
1活性单位(U)是指在50μL反应体系中,50℃ 1h内可以完全将1μg的超螺旋pUC19 DNA转化成开环形式所需的酶量。
保存:-20℃
超长时间温育检测:将10U Nt.BspQI与超螺旋pUC19 DNA底物在50℃温育16h,通过琼脂糖凝胶电泳检测开环DNA无变化。
RNase残留检测:将10U Nt.BspQI与500ng RNA在37℃温育1h,使用琼脂糖凝胶电泳检测超过90%的RNA仍保持完整。
80℃温育20min。
相关搜索:Nt.BspQI切刻内切酶,BspQI,切口酶,GCTCTTCN,切刻酶
1活性单位(U)是指在50μL反应体系中,50℃ 1h内可以完全将1μg的超螺旋pUC19 DNA转化成开环形式所需的酶量。
组分 | 规格 |
Nt.BspQI切刻内切酶 | 2000U |
说明书 | 1份 |
保存:-20℃
超长时间温育检测:将10U Nt.BspQI与超螺旋pUC19 DNA底物在50℃温育16h,通过琼脂糖凝胶电泳检测开环DNA无变化。
RNase残留检测:将10U Nt.BspQI与500ng RNA在37℃温育1h,使用琼脂糖凝胶电泳检测超过90%的RNA仍保持完整。
80℃温育20min。
- 不同DNA中的酶切位点数量
λDNA ΦX174 pBR322 pUC57 pUC18/19 SV40 M13mp18/19 Adeno2 10 1 1 1 1 0 0 7 - 甲基化修饰影响
Dam Dcm CpG EcoKI EcoBI 无影响 无影响 无影响 无影响 无影响
- DNA酶切流程
- 在冰上按如下建议的加样顺序配制反应体系:
成分 用量 ddH2O 至50μL 10×Cut Buffer C 5μL 底物DNA 1μg Nt.BspQI(10U/μL) 1μL 总体积 50μL - DNA底物中应不含苯酚、氯仿、乙醇、EDTA、洗涤剂或高浓度盐,否则将会影响Nt.BspQI酶活性。
- 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴;
- 50℃温育30min~1h;
- 80℃温育20min即可使酶失活,停止反应,或者通过吸附柱或苯酚/氯仿纯化终止反应。
- 在冰上按如下建议的加样顺序配制反应体系:
- 注意事项
- 反应体系中加入的酶体积不应超过总体积的10%,避免酶中过多的甘油引起星号活性;
- 限制性内切酶存储缓冲液中的添加剂(例如甘油、盐)与底物溶液中的污染物(例如盐、EDTA或乙醇等)相同,反应体积越小,酶切反应抑制效应越强。
- 反应体系中加入的酶体积不应超过总体积的10%,避免酶中过多的甘油引起星号活性;
相关搜索:Nt.BspQI切刻内切酶,BspQI,切口酶,GCTCTTCN,切刻酶